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中國科學(xué)家實(shí)驗(yàn)室內(nèi)改造“蜘蛛人” 修復(fù)缺陷胚胎

  • 2018年8月31日 FanTianQing來源:新浪新聞 1339 88
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馬凡綜合征這一疾病由法國醫(yī)生Antoine Marfan最先報告,并因此命名。患病特征為四肢、手指、腳趾細(xì)長不均勻,又被稱為“蜘蛛人”。這種疾病幾乎可以影響身體的任何部位,從松弛的關(guān)節(jié)、弱視到心臟壁上危及生命的裂縫。

中國科學(xué)家實(shí)驗(yàn)室內(nèi)改造“蜘蛛人”,修復(fù)缺陷胚胎。

通過基因編輯技術(shù)對人體胚胎“動刀”獲得的“設(shè)計(jì)嬰兒”目前尚未走向臨床,但這不妨礙部分科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行基礎(chǔ)研究。日前,國際學(xué)術(shù)期刊《分子治療》(Molecular Therapy)在線發(fā)表了上海科技大學(xué)黃行許教授和廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院劉見橋等人的最新研究成果,利用堿基編輯器技術(shù)成功糾正了人類胚胎中的馬凡綜合癥(Marfan syndrome)的致病突變。

馬凡綜合征這一疾病由法國醫(yī)生Antoine Marfan最先報告,并因此命名?;疾√卣鳛樗闹⑹种浮⒛_趾細(xì)長不均勻,又被稱為“蜘蛛人”。這種疾病幾乎可以影響身體的任何部位,從松弛的關(guān)節(jié)、弱視到心臟壁上危及生命的裂縫。

全球每5000人中就有1人患有馬凡綜合征,患者大部分在30-50歲之間死于心血管疾病。目前,馬凡綜合征尚無特效藥,主要通過手術(shù)糾正病變減輕癥狀,但費(fèi)用昂貴且不能根治。具體來說,該疾病是一種常染色體顯性遺傳病,由15號染色體上FBN1基因(編碼原纖維蛋白1)中單個堿基突變(腺嘌呤A突變?yōu)轼B嘌呤G)引起。當(dāng)FBN1基因發(fā)生突變時,人體骨骼中的軟質(zhì)部分,即彈性纖維蛋白數(shù)量就會比正常人少一半,導(dǎo)致骨骼在生長過程中會變得異常長。

此番,黃行許等人選擇的“修正”工具并非是典型常用的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),而是采用了新型的單堿基編輯器BE。這也是中國科學(xué)家首次通過堿基編輯技術(shù)在人類胚胎上糾正遺傳疾病的致病突變。

堿基編輯器BE由基因編輯界大牛哈佛大學(xué)David Liu實(shí)驗(yàn)室在2016年開發(fā)。通過在Cas9蛋白上安裝大鼠胞苷脫氨酶APOBEC1,Cas9的“剪刀”功能消失,不再切割DNA雙鏈,但仍能結(jié)合目標(biāo)DNA片段,同時能將胞嘧啶C轉(zhuǎn)化為尿嘧啶U。之后,再通過第三種蛋白,讓細(xì)胞啟動DNA修復(fù)程序,最終使得C-G堿基對替換為T-A堿基對。

如果說CRISPR/Cas9被譽(yù)為“基因魔剪”, 堿基編輯器BE則更像是批改單個堿基的帶有橡皮擦的鉛筆。相對于CRISPR/Cas9,堿基編輯器BE更安全、脫靶效應(yīng)也更低。

研究團(tuán)隊(duì)在獲得得個體捐獻(xiàn)者的知情同意情況下,收集了臨床上廢棄的不成熟的卵子,并進(jìn)行體外成熟,然后利用體外受精技術(shù)(IVF)將成熟的卵母細(xì)胞與馬凡綜合征患者捐贈的精子制備成能自行發(fā)育的人類胚胎。所有研究工作均取得了相關(guān)倫理委員會的批準(zhǔn)。

16-18小時后,即1細(xì)胞期時,研究團(tuán)隊(duì)對其中部分受精卵顯微注射含有校正sgRNA的BE編輯系統(tǒng)。測試組和對照組胚胎均在實(shí)驗(yàn)室條件下存活了2天,以進(jìn)行編輯效果測試。

研究得出,所有的18個測試胚胎均被編輯,無一例“脫靶”。其中16個胚胎僅攜帶FBN1基因經(jīng)過修正的版本,而另外2個胚胎中發(fā)生了額外的不需要的編輯?!翱偟膩碚f,這項(xiàng)試點(diǎn)研究提供了概念驗(yàn)證,并開啟了基于基因編輯的基因治療的潛力。”黃行許表示。

值得一提的是,世界上第一例對人類胚胎基因的編輯修改即由中國科學(xué)家完成。2015年,中山大學(xué)教授黃軍發(fā)表論文,宣布利用CRISPR-Cas9技術(shù)試圖修改人類胚胎中的一個致病基因,該突變致病基因會導(dǎo)致嚴(yán)重遺傳病β-地中海貧血癥。

黃軍當(dāng)時所用的胚胎來自于當(dāng)?shù)蒯t(yī)療機(jī)構(gòu)無法發(fā)育成嬰兒的缺陷胚胎。當(dāng)年,黃軍還被《自然》期刊評為十大年度科學(xué)人物。

2017年8月,《自然》在線發(fā)表了美國俄勒岡州健康和科學(xué)大學(xué)的俄裔研究員舒赫拉特?米塔利波夫(Shoukhrat Mitalipov)等人的成果,繼中國之后,美國也迎來第一批經(jīng)過基因編輯的人類胚胎。

盡管類似的“設(shè)計(jì)嬰兒”研究在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)屢屢出現(xiàn)成果,但這些經(jīng)過基因編輯過的胚胎目前尚無可能存活太久。目前科學(xué)界普遍認(rèn)為,應(yīng)允許開展相關(guān)基礎(chǔ)研究,但還不能擴(kuò)展到生殖領(lǐng)域的臨床應(yīng)用。

劉見橋此番就提到,因倫理問題和相關(guān)法律法規(guī)的限制,以及研究可靠性、安全性的驗(yàn)證等,這一技術(shù)距離臨床應(yīng)用尚有一段距離。

此前的7月底,美國獨(dú)立性民調(diào)機(jī)構(gòu)皮尤研究中心(Pew Research Center)對2537名美國成年人進(jìn)行的一份調(diào)查表明,65%的人反對在人類胚胎上測試基因編輯技術(shù);只有33%的人認(rèn)為,為了發(fā)展基因編輯技術(shù),在人類胚胎上測試這一技術(shù)是合適的。

有近60%的人認(rèn)為基因編輯“非??赡堋睂?dǎo)致不平等加劇,因?yàn)樵摷夹g(shù)只有富人用得起;54%的人表示,“雖然在某些情況下,運(yùn)用基因編輯技術(shù)是合理的,但某些方面在道德上不可接受”;只有18%的受訪者表示,基因編輯技術(shù)的發(fā)展很可能“為整個社會的醫(yī)學(xué)進(jìn)步鋪平了道路”。

不過,同樣在7月份公布的另一份報告,即英國納菲爾德生物倫理學(xué)協(xié)會發(fā)布的《基因編輯和人類生殖:社會與倫理問題》則認(rèn)為,在充分考慮科學(xué)技術(shù)及其社會影響的條件下,通過基因編輯技術(shù)修改人體胚胎、精子或卵細(xì)胞細(xì)胞核中的DNA(脫氧核糖核酸)“倫理上可接受”。

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